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技術文章
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技術文章
2024-429
微生物是發酵工業的靈魂，對微生物控制的發酵過程進行優化，我們要了解發酵罐中微生物的生長反應特性。微生物細胞生長是細胞個體內許多化學反應的綜合結果。這些反應包括合成提供其它反應需要的吉布斯自由能；利用底物合成結構單元，再聚合成大分子物質，供合成細胞所需等。正常情況下，微生物細胞為了確保有序和高效生長，必須將這些反應有機地結合在一起，經濟地分配胞內各代謝途徑的通量。大腸桿菌是發酵研究中用得最多的微生物。在大腸桿菌生長過程中前人已觀察到下列現象∶(1)在大腸桿菌快速生長期間，生物合...
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[實驗原理]當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法，電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型，包括細菌、酵母、植物和動物細胞；而且，它還能作為注射方法（稱為電注射），把各種外源物質引入活細胞。與其他常用的導入外源物質的方法相比，電穿孔具有很多優點。一.不必象顯微鏡那樣使用玻璃針，不需要技術培訓和昂貴的設備，可以一次對成百萬...
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內毒素去除方法概述內毒素是存在于革蘭氏陰性細菌外膜中的致病因子，具有較好的耐熱性和穩定性，對人體健康有著不可忽視的危害。本文將概述內毒素的成分和特性，并討論了目前常見的內毒素去除方法包括超濾去除法、活性炭法、表面活性劑萃取、強酸強堿、層析法等。同時還分析了各種方法的優缺點以及在工業生產中的應用前景。一、超濾去除法和活性炭法內毒素由多糖O抗原、核心多糖和類脂A等組成，作為細菌外膜的主要結構成分，不易被化學藥品破壞。為了有效去除內毒素，可以采用多種方法。超濾去除法通過使用孔徑適當...
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【實驗原理】磷酸鈣沉淀法是基于磷酸鈣-DNA復合物的一種將DNA導入真核細胞的轉染方法。磷酸鈣有利于促進外源DNA與靶細胞表面的結合。磷酸鈣-DNA復合物粘附到細胞膜并通過胞飲作用進入靶細胞，被轉染的DNA可以在細胞內進行瞬時表達，也可整合到靶細胞的染色體上從而產生不同基因型和表型的穩定克隆。該方法可廣泛用于轉染許多不同類型的細胞。細胞轉染試劑【儀器、材料和試劑】（一）儀器、用具CO2培養箱[1]、10cm細胞培養平板、巴斯德吸管、微量移液器[2]、15ml錐形管、燒杯、量筒...
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CRISPR/Cas（ClusteredRegularlyInterspacedShortPalindromicRepeats/CRISPR-associatedprotein）系統是當前先進的基因編輯技術之一。該技術因其高效、精確和相對容易操作的特點，在生物醫學、農業、生物技術等領域獲得了廣泛的應用。CRISPR/Cas系統主要包含兩個部分：一個能夠識別目標DNA序列的導向RNA（gRNA）和一個能夠切割DNA的Cas蛋白。通過設計特定的gRNA來引導Cas蛋白到特定的DN...
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