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技術文章
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2024-430
對于一般的分析工作，特別是定量分析工作來講，人們強調制備的凝膠要有較好的可重復性。如果制備得到的凝膠本身沒有重復性，比如孔徑前后兩次凝膠相差頗大，那么在這樣的條件下，所得到的分析結果，其可信性就有問題，往往會使幾次結果不能重復。所以，為了要獲得可靠的分析結果，在制膠時對能影響凝膠聚合的種種因素必須加以控制。有哪些主要因素，又怎樣來控制它們的條件，分別簡述如下：(1)制備凝膠用的主要試劑(a)丙烯酰胺、甲叉雙丙烯酰胺至少是分析純級的試劑。存放時間一般不超過1年,如果存放時間過長...
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無論從事何種細胞培養，無菌技術都是絕對最重要的部分。細胞培養前的無菌處理技術分為三部分即：①工作環境及表面的處理；②細胞培養所用玻璃及塑料制品的處理；③實驗者的操作技術；還有哺乳動物細胞的處理及維持細胞生長所需要的培養液的無菌處理。1.工作環境的無菌處理在細胞培養早期，研究者可以依靠操作技術和盡可能地靠近火焰以達到細胞的無菌化，隨著工作環境的機械學發展，其無菌化程度已得到大大提高，免去了實驗者手指被燒灼的痛苦。層流超凈臺是使工作臺無菌化有效的手段，組織培養可在相對密閉而幾乎無...
查看更多2024-429
懸浮細胞的電融合轉染技術融合懸浮細胞的步驟與電穿孔的很類似，只是在進行高強度的電場脈沖前后，必須用低幅、高頻電場使細胞排成一條鏈。1用融合介質（FM）洗懸浮細胞兩次，然后懸于FM中。洗滌細胞時，在臺式離心機上1000rpm下離心3分鐘，得到細胞沉淀，棄去上清液將細胞懸于新鮮FM介質中。2將懸浮細胞轉移到相應的融合室內。假如要使兩種不同的細胞彼此融合，轉移前要充分混合。3啟動介電電泳場，其振幅通常小于200V/cm，頻率在2MHz以內，用顯微鏡檢測細胞是否排成一條鏈，調節振幅和...
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微生物是發酵工業的靈魂，對微生物控制的發酵過程進行優化，我們要了解發酵罐中微生物的生長反應特性。微生物細胞生長是細胞個體內許多化學反應的綜合結果。這些反應包括合成提供其它反應需要的吉布斯自由能；利用底物合成結構單元，再聚合成大分子物質，供合成細胞所需等。正常情況下，微生物細胞為了確保有序和高效生長，必須將這些反應有機地結合在一起，經濟地分配胞內各代謝途徑的通量。大腸桿菌是發酵研究中用得最多的微生物。在大腸桿菌生長過程中前人已觀察到下列現象∶(1)在大腸桿菌快速生長期間，生物合...
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[實驗原理]當細胞置于非常高的電場中，細胞膜就變得具有通透性，能讓外界的分子擴散進細胞內，這一現象稱為電穿孔。運用這一技術，許多物質，包括DNA、RNA、蛋白質、藥物、抗體和熒光探針都能載入細胞。作為一種基因轉導方法，電穿孔已被廣泛用于各種細胞類型，包括細菌、酵母、植物和動物細胞；而且，它還能作為注射方法（稱為電注射），把各種外源物質引入活細胞。與其他常用的導入外源物質的方法相比，電穿孔具有很多優點。一.不必象顯微鏡那樣使用玻璃針，不需要技術培訓和昂貴的設備，可以一次對成百萬...
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