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用肉眼或光學顯微鏡檢測支原體比較困難,所以支原體檢測一般會通過PCR的檢測、DNA染色、熒光標記、瓊脂平板接種等方法來實現。在支原體檢測之前,細胞應連續培養至少兩周,以便有時間讓低水平的污染物生長。對于測試,在取樣前至少兩三天內不應更換培養基。一、培養法在瓊脂平板/肉湯上培養被認為是檢測支原體的“金標準”。在這種方法中,將細胞培養物的上清液添加到液體或半固體培養基(含有支原體生長所必需的營養物質)中。受感染的細胞培養物會在液體肉湯和瓊脂平板上生長。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...
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細胞生物學研究、創新藥開發等領域經常會進行細胞體外培養,但是很多實驗員不知道該怎么選購細胞、細胞培養基、細胞培養試劑,本節小編帶你初步了解一下細胞系的選擇技巧、購買細胞培養基應考慮的因素。一、細胞培養的環境條件細胞的體外培養需要為細胞創造良好的細胞的存活和增殖環境,這樣的環境條件包括培養溫度、濕度和CO2水平、營養成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數哺乳動物細胞的細胞培養的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...
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我們知道開始培養的細胞不能無限期地生長,因為受限區域內的細胞數量不斷增加,營養物質也會被消耗,從而導致有毒的代謝產物增加,另外根據實驗或生產需要,也要對細胞進行擴大培養。通過去除培養基并將細胞轉移到新鮮的生長培養基和基質中,細胞獲得了新鮮的營養并去除了有毒代謝物,從而可以長期維持培養。這個過程就屬于傳代培養,傳代培養的細胞密度會低于原始培養物中的細胞密度。當接種細胞后,細胞生長會經過滯后期、對數期,穩定期和凋亡期。在凋亡期,細胞會因缺乏營養或培養條件不當而死亡。貼壁細胞傳代培...
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過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護級別以及過濾器需要多久更換一次,這些都是購買生物安全柜時需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區別呢?生物安全柜中使用的過濾器,一般為高效微??諝?HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器,HEPA和ULPA過濾器有什么區別呢?HEPA和ULPA過濾器的結構及其工作原理從結構和化學角度來說,HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜,其中氣流(由電機驅動)攜帶有害氣體和顆...
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國產PCR儀購買時的注意事項PCR儀作為分子生物學相關實驗的常規儀器,每年都有數千臺的選購量,這兩年一批國產PCR儀正在興起。購買國產PCR儀需要考慮以下因素1樣本管的種類現在主要有0.2ml和0.5ml兩種,使用0.5mlPCR管的人員已經很少了,一是0.5mlPCR專用的薄壁管很少見,二是如果想要較大體積的PCR產物,可以通過多分幾個0.2mlPCR管來實現。除非經常需要較大體積的PCR產物,否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀。2樣本容量種類很多,0.2ml的有96孔...
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